二級生物安全實驗室的選址
1 就選址而言，盡管二級生物安全實驗室沒有特殊的要求，但是從生物安全角度講該實驗室所處的位置比較理想。
主實驗室技術(shù)參數(shù)：
1、潔凈度8級 Cleanliness Class 8
大于等于0.5μm的塵粒數(shù)大于352000粒/m3（352粒/L）到小于等于352000粒/m3(3520粒/L),大于等于3μm的塵粒數(shù)大于3000粒/m3(3粒/L)到小于等于30000粒/m3(30粒/L)。
2、照度：**≥300Lx,
3、噪聲：≤60dB
4、相對濕度：30%~65%
5、溫度：18-25℃
6、壓差：-10Pa
7、氣流方向：單相流，從清潔區(qū)流向污染區(qū)
8、墻面、吊頂：彩鋼板：鋼板厚度0.426，15克覆膜
9、鋁合金：門窗用電泳材質(zhì)，其余均采用噴塑。
10、凈化門：帶觀察窗，閉門器
11、高效送風口：不銹鋼沖壓成型
12、地面：PVC卷材
13、洗手盆：不銹鋼材質(zhì)，內(nèi)含感應(yīng)水龍頭、自動干手器
14、傳遞窗：不銹鋼機械連鎖
15、洗眼器：不銹鋼臺式
16、送風機組：內(nèi)含新風口、新風回風混合段、送風段、均流段（維修段）、中效段、出風段、消聲段
17、排風機組：出口有高效過濾器過濾
18、操作臺：貼面理化板
19、入口處有國際通用生物安全危險符號，同時有標明實驗室名稱、預(yù)防措施負責人、緊急聯(lián)絡(luò)方式的有機玻璃板。在出口處有黑暗中可明確辨認的安全出口標志。
圍護結(jié)構(gòu)
BSL－1實驗室
1) 無需特殊選址，普通建筑物即可，但應(yīng)有防止節(jié)肢動物和嚙齒動物進入的設(shè)計。
2) 每個實驗室應(yīng)設(shè)洗手池，宜設(shè)置在靠近出口處。
3) 在實驗室門口處應(yīng)設(shè)掛衣裝置，個人便裝與實驗室工作服分開放置。
4) 實驗室的墻壁、天花板和地面應(yīng)平整、易清潔、不滲水、耐化學品和消毒劑的腐蝕。地面應(yīng)防滑，不得鋪設(shè)地毯。
5) 實驗臺面應(yīng)防水，耐腐蝕、耐熱。
6) 實驗室中的廚柜和實驗臺應(yīng)牢固。廚柜、實驗臺彼此之間應(yīng)保持一定距離，以便于清潔。
7) 實驗室如有可開啟的窗戶，應(yīng)設(shè)置紗窗。
8) 實驗室內(nèi)應(yīng)保證工作照明，避免不必要的反光和強光。
9) 應(yīng)有適當?shù)南驹O(shè)備。
BSL-2實驗室
1) 滿足BSL－1的要求。
2) 實驗室門應(yīng)帶鎖并可自動關(guān)閉。實驗室的門應(yīng)有可視窗。
3) 應(yīng)有足夠的存儲空間擺放物品以方便使用。在實驗室工作區(qū)域外還應(yīng)當有供長期使用的存儲空間。
4) 在實驗室內(nèi)應(yīng)使用專門的工作服；應(yīng)戴乳膠手套。
5) 在實驗室的工作區(qū)域外應(yīng)有存放個人衣物的條件。
6) 在實驗室所在的建筑內(nèi)應(yīng)配備高壓蒸汽滅菌器，并按期檢查和驗證，以保證符合要求。
7）應(yīng)在實驗室內(nèi)配備生物安全柜。
8) 應(yīng)設(shè)洗眼設(shè)施，必要時應(yīng)有應(yīng)急噴淋裝置。
9) 應(yīng)通風，如使用窗戶自然通風，應(yīng)有防蟲紗窗。
10) 有可靠的電力供應(yīng)和應(yīng)急照明。必要時，重要設(shè)備如培養(yǎng)箱、生物安全柜、冰箱等應(yīng)設(shè)備用電源。
11) 實驗室出口應(yīng)有在黑暗中可明確辨認的標識。
下面分類詳細介紹如下：
1 實驗室圍護結(jié)構(gòu)采用彩鋼板材料，表面光滑、耐腐蝕、防水，所有縫隙可靠密封，便于清潔消毒，且防震、防火。
2 天花板、地板、墻壁間的交角均為圓弧形，且可靠密封。
3 地面采用PVC材料，防滲漏、無接縫、光潔、防滑。
4 實驗室的所有門均可自動關(guān)閉。
5 實驗臺面采用理化板，防水、耐腐蝕、耐熱。
6 所有入口處均能防止節(jié)肢動物和嚙齒動物進入。
7 實驗室出口有在黑暗中可明確辨認的標識。
平面結(jié)構(gòu)與分區(qū)
1 分區(qū)：分為清潔區(qū)、半污染區(qū)和污染區(qū)
1.1 清潔區(qū)：用于實驗人員辦公活動、休息的區(qū)域。
1.2 半污染區(qū)：即緩沖走廊，用于標本的傳送、廢物的輸出、進入更衣室，?
1.3 污染區(qū)：是實驗室的核心區(qū)域，用于實驗操作。
2 設(shè)置：包括配電箱、空調(diào)、更衣柜、II級生物安全柜、實驗臺、洗手池、洗眼器、傳遞窗等。?
實驗室消毒隔離要求
1 要求
1.1 實驗室相對獨立，通過隔離門與公共部位相隔。實驗核心區(qū)應(yīng)包括實驗室間及與相連的緩沖走廊，明確劃分為清潔區(qū)、半污染區(qū)和污染區(qū)。
1.2 實驗室內(nèi)所有物品應(yīng)專用，需帶出時必須嚴格消毒。
1.3 實驗室工作人員進入實驗室應(yīng)穿戴好個人防護用品
1.4 培養(yǎng)基、組織、體液等必須放入防漏密閉的容器內(nèi)儲運。
1.5 血清學試驗、致病菌檢測、樣品處理及分裝應(yīng)在II級生物安全柜內(nèi)進行。
1.6 樣本離心時，離心機應(yīng)放在排毒柜內(nèi)或生物安全柜內(nèi)進行，以防產(chǎn)生氣溶膠或濺出。
1.7 實驗過程中使用的器材、實驗廢棄物均應(yīng)按規(guī)定進行消毒、滅菌處理。
1.8 實驗完畢，先消毒物體表面，再按規(guī)定程序脫下個人防護用品，并進行空氣消毒。
1.9 離開實驗室前，必須按有關(guān)規(guī)定清潔消毒雙手。
1.10 儀器設(shè)備運出實驗室前必須按有關(guān)規(guī)定進行嚴格消毒。
2 消毒方法
2.1 實驗室內(nèi)空氣消毒
2.1.1 可使用送排風系統(tǒng)加強通風。
2.1.2 紫外線燈管、燈車適用于無人室內(nèi)空氣、物體表面的消毒。常用的室內(nèi)懸吊式紫外線燈對室內(nèi)空氣消毒時安裝的數(shù)量為平均1.5W/m3（照射強度≥70MW/cm2），照射時間不少于60分鐘。
2.2 實驗室表面消毒
2.2.1 地面
實驗室地面要濕式拖掃，禁止干拖干掃。需消毒時，可用有效氯為500-1000mg/L的含氯消毒液噴灑或拖地，消毒液用量不小于100ml/m3。污染區(qū)和清潔區(qū)拖把應(yīng)專用，不得混用。使用后，用上述消毒液浸泡30分鐘，再用水清洗干凈，懸掛晾干，**在陽光下曬干后備用。
2.2.2 物體表面的消毒
實驗臺、桌、椅、凳、門把手等可用有效氯為500-1000mg/l的含氯消毒液噴灑或擦拭，并作用10-15分鐘后及時用清水擦洗，以除去殘留的消毒液。
2.2.3 手的消毒
實驗室工作完畢后應(yīng)立即進行手的清洗和消毒。采用感應(yīng)式自動洗手設(shè)備，使用瓶裝式液體皂，洗手后可用一次紙巾擦拭，**用烘干機烘干。離開實驗室前，脫掉工作服后，應(yīng)進行手的清洗。
2.2.4 病原微生物實驗污水消毒
按GB(8466-2001《醫(yī)療機構(gòu)污水排放要求》執(zhí)行。
清潔管理制度
1 實驗室清潔的原則
實驗室的清潔工作要在保證生物安全的前提下進行，符合生物安全防護的要求，遵守先消毒后清潔的原則。一般情況下，生物安全實驗室應(yīng)由專門人員進行消毒，但每名實驗室工作人員都有責任做好實驗室清潔和消毒工作。
2 清潔和消毒用品
實驗室應(yīng)備有必要的清潔和消毒用品，主要包括拖把、抹布或紗布、水桶、消毒液、配好的75%乙醇等。
3 消毒劑
主要是過氧乙酸、含氯消毒劑等。
4 消毒器械
主要是紫外線燈、紫外線燈車。紫外線的穿透能力特別弱，因此必須定時定期對紫外線燈進行清潔。一般情況下每月使用浸有75%乙醇的抹布擦拭燈管一次，擦拭前，先拔掉插頭并冷卻10分鐘；還應(yīng)經(jīng)常檢測紫外線燈的照射強度，當照射強度低于原始照射強度的70%時，就應(yīng)由專業(yè)人員更換燈管，一般情況下每三個月檢查一次紫外線燈的照射強度。
5 保持實驗室環(huán)境的整潔
實驗室內(nèi)禁止飲食、吸煙、會客和喧嘩。每項工作完成后，必須清潔臺面，恢復(fù)實驗室的待運行狀態(tài)。實驗室臺面和器械應(yīng)在每次實驗操作完成后及時用消毒液擦拭表面。
6 實驗室地面的清潔
實驗室地面要濕式拖掃，禁止干拖干掃。需消毒時，可用0.1%過氧乙酸或有效氯為500-1000mg/l的含氯消毒液噴灑或拖地，消毒液的用量不得少于100ml/m2。污染區(qū)和清潔區(qū)拖把應(yīng)專用 ，不得混用。使用后，用上述消毒液浸泡30分鐘，再用水清洗干凈，懸掛晾干，**在陽光下曬干后備用。每次實驗完畢后由工作人員使用消毒液拖地，每月徹底清洗一次。
7 實驗臺、桌、椅、凳。門把手的清潔
可用0.1%過氧乙酸拖地或有效氯為500-1000mg/l的含氯消毒液噴灑或擦拭，作用10-15分鐘后及時用清水擦洗，以除去殘留的消毒液。
8 紡織品的清潔
棉織工作服、帽子、口罩等放入專用的污物袋中，用70℃以上熱水加洗滌劑洗滌；有明顯病原微生物污染時，隨時噴灑消毒液消毒或放入專用污物袋中，進行高壓蒸汽滅菌處理。
9 儀器設(shè)備的清潔
可用消毒液或75%乙醇擦拭表面消毒，再用中性洗滌劑和清水擦洗去污。
10 手的清洗
實驗室工作完畢后應(yīng)立即進行手的清洗和消毒。采用感應(yīng)式自動洗手設(shè)備，使用瓶裝式液體皂，洗手后可用一次紙巾擦拭，**用烘干機烘干。離開實驗室前，脫掉工作服后，應(yīng)進行手的清洗。

消毒隔離制度
1 及時消毒
1.1 當實驗微生物污染實驗環(huán)境時，應(yīng)立即停止實驗，用有效消毒液進行消毒處理。
1.2 實驗室被空氣和氣溶膠傳播的病原微生物污染時，應(yīng)立即關(guān)閉實驗室進行消毒處理。
1.3 可疑污染的物品帶出生物安全實驗室前，應(yīng)進行徹底滅菌或消毒處理。菌株和相關(guān)樣本應(yīng)對樣本的載體和包裝容器表面進行嚴格滅菌或消毒處理后，方可帶出，且在取出樣本時應(yīng)對載體進行再次消毒處理，對包裝容器進行滅菌或消毒處理。
1.4 盛裝污染微生物實驗耗材的容器應(yīng)有足量的消毒液，用過的耗材立即浸入消毒液中。
1.5 實驗結(jié)束后，應(yīng)立即對實驗環(huán)境進行消毒處理，如擦洗、消毒工作臺面、地面，開啟紫外線燈照射1小時以上。
1.6 實驗完成后，對實驗廢棄物應(yīng)立即進行高壓滅菌或消毒等無害化處理。
1.7 實驗人員在實驗結(jié)束后應(yīng)立即清洗消毒雙手，洗臉，必要時應(yīng)洗澡更衣。
2 徹底消毒
2.1 對需消毒的物品應(yīng)采取徹底的消毒措施，不留死角。
2.2 消毒液浸泡消毒時，要將被消毒物品全部浸泡在消毒液中，對有管腔的物品，應(yīng)將消毒液灌入管腔，排除氣栓。
2.3 消毒劑擦拭消毒時，要將消毒液擦拭需要消毒物品的所有表面并保持充分作用時間。
2.4 消毒對象的選擇要根據(jù)試驗情況而定，凡可能接觸試驗微生物的實驗器材、試驗環(huán)境(包括臺面、地面、墻壁、空氣)、人員(個體及防護用品等)均應(yīng)采取相應(yīng)消毒處理。
3 有效消毒
3.1 要根據(jù)消毒對象和微生物的種類選擇合適的消毒和滅菌方法。
3.1.1 對細菌芽孢、真菌孢子污染的物品，選用高水平消毒或滅菌法。對于受高抵抗力致病因子污染的器材必須用氫氧化鈉和高壓蒸汽(136℃，60分鐘)進行消毒處理。
3.1.2 對受到分枝桿菌、真菌、親水病毒、螺旋體、支原體、衣原體等病原微生物污染的物品，選用中水平以上消毒方法。
3.1.3 對受到一般細菌繁殖體、親脂病毒等污染的物品，選用中水平或低水平消毒方法。
3.14 存在較多有機物(如血液、分泌物、排泄物)的物品消毒時，應(yīng)加大消毒藥物的使用劑量和/或處長作用時間。
3.1.5 消毒物品上微生物污染特別嚴重時，應(yīng)加大消毒劑的的使用劑量和/或處長作用時間。
3.1.6 選擇表面消毒方法，應(yīng)考慮表面性質(zhì)，光滑表面可選擇紫外線消毒器近距離照射或消毒液擦拭，多孔材料表面可采用噴霧消毒法。
3.2 消毒器械和消毒液應(yīng)有衛(wèi)生許可批文。
3.2.1 消毒產(chǎn)品應(yīng)在有效期內(nèi)使用，應(yīng)按照說明書標示的作用濃度(或強度)、作用時間和使用方法進行消毒操作。連續(xù)使用的消毒劑應(yīng)定期測試有效成分含量并及時更換。
3.2.2 消毒、滅菌設(shè)備應(yīng)定期測定消毒或滅菌效果。大型消毒、滅菌設(shè)備在正式使用前和大修后，應(yīng)通過性能檢測，證明可以有效使用。
4 注意事項
4.1 要減少消毒處理對人體的傷害、對物品的破壞、對環(huán)境的影響。
4.2 根據(jù)被消毒物品的理化性狀，選擇相容性好的消毒劑。耐高溫、耐濕的物品和器材，**高壓蒸汽滅菌；金屬、玻璃器材、油劑類和干粉類等可選干熱滅菌。畏熱、畏濕、畏腐蝕及貴重物品，可選環(huán)氧乙烷薰蒸消毒、滅菌。
4.3 用于人體消毒的消毒劑應(yīng)選擇對人體皮膚粘膜刺激較小的消毒劑。
4.4 用于環(huán)境消毒的消毒劑，要嚴格按照消毒對象、目標污染物種類以及污染程度，以其達到有效消毒、又不污染環(huán)境為前提，合理選擇消毒劑使用濃度和作用時間。
實驗室廢棄物管理
1 實驗后的廢棄物如不及時處置則會污染環(huán)境，從而對工作人員造成危害，因此有關(guān)人員必須嚴格按規(guī)定執(zhí)行。
2 實驗樣本在處理和進行實驗室檢測時產(chǎn)生的廢棄物，如平皿、吸頭盒、塑料試管等應(yīng)放入適當?shù)娜萜骰驀栏穹缆┑母邏捍鼉?nèi)。
3 實驗過程中產(chǎn)和生的污染性液體物質(zhì)、廢棄的液體標本、培養(yǎng)物等應(yīng)放在盛有消毒液的嚴格防漏的專用容器中，并及時加蓋。
4 進行實驗所必須使用的銳器，如一次性注射器、針頭、微量移液器吸頭、玻璃器具、手術(shù)刀片及碎玻璃，必須放入指定專用的堅壁容器中，加蓋密封。
5 以上所有盛有廢棄物的容器，在每次實驗完成后，應(yīng)送高壓滅菌。
6 實驗室所有垃圾及用過的乳膠手套、隔離衣、口罩、一次性帽子等，裝于相應(yīng)的污物袋內(nèi)，經(jīng)高壓消毒處理后丟棄。
7 所有臨床標本在留驗期過后，均應(yīng)高壓消毒處理后再進行后續(xù)處理。
8 高壓鍋應(yīng)有專人負責，嚴格按使用說明操作，確保在121℃條件下，高壓至少30分鐘，以達到有關(guān)滅菌消毒要求。
9 所有實驗產(chǎn)生的廢棄物，必須經(jīng)嚴格高壓消毒后方能運出實驗區(qū)，并送到指定地點集中焚燒處理。
10 空化學制品容器
10.1 非危險性的空化學制品：依照通則消毒后，按普通廢棄物分類處理。
10.2 危險性空化學制品：不得將危險性空化學品容器按普通廢棄物處理。根據(jù)有關(guān)危險化學制品處理辦法進行相應(yīng)無害化處理或由上級主管部門處理。
11 如果遇到本作業(yè)指導(dǎo)書中未提及的情況，請與實驗室安全部門聯(lián)系。
常規(guī)安全操作規(guī)程
1 禁止非工作人員進入實驗室，參觀實驗室等特殊情況須實驗室主任批準方可進入。
2 嚴禁在實驗室工作區(qū)飲食、吸煙、處理隱形眼鏡、化妝、存放食物和日常生活用品。
3 與實驗無關(guān)的物品不得帶入實驗室。
4 接觸微生物或含有微生物的物品后，要洗手；離開實驗室前要脫掉并洗手。
5 實驗過程中，嚴格按有關(guān)操作規(guī)程操作，降低濺出和氣溶膠的產(chǎn)生。
6 每天至少消毒一次工作臺面，活性物質(zhì)濺出后要隨時消毒。
7 以移液器吸取液體，嚴禁口吸。
8 所有培養(yǎng)物、廢棄物在運出實驗室前必須經(jīng)可行的消毒或滅活，如高壓消毒。需運出實驗室消毒的物品應(yīng)置于防滲漏的專用密閉容器內(nèi)。
9 制定尖銳器具的安全操作規(guī)程。
10 制定有效的防鼠防蟲措施。
11 實驗室入口須貼上醒目的生物危險標志，注明危險因子、生物安全級別、實驗室負責人及其他相關(guān)負責人姓名、電話。
第二章 特殊安全操作規(guī)程
1 實驗室相對獨立，明確劃分清潔區(qū)、半污染區(qū)和污染區(qū)，三區(qū)不得交叉，人流與物流分開。
2 進行感染性實驗時，禁止他人進入實驗室，或必須經(jīng)實驗室主任同意方可進入；免疫耐受或正在使用免疫抑制劑的工作人員不得進入實驗室，或必須經(jīng)實驗室主任同意方可進入。
3 工作人員應(yīng)接受必要的免疫接種和檢測（如乙型肝炎疫苗、卡介苗等）。
4 必要時收集從事危險性工作人員的基本血清留底，并根據(jù)需要定期收集血清樣本，檢測并出具報告，如有問題及時解決。
5 實驗室主任應(yīng)制定規(guī)章制度和生物安全程序，并納入生物安全手冊，由實驗室負責人專門保管，工作人員在進入實驗室前要閱讀并在工作中遵照執(zhí)行；其他人員須告知其潛在風險并符合進入實驗室要求，經(jīng)實驗室主任允許方可進入。
6 工作人員須接受有關(guān)的潛在危險知識的培訓(xùn)，掌握預(yù)防暴露及暴露后的消毒處理程序；每年要接受一次最新的培訓(xùn)。
7 除特殊情況，禁止在實驗室使用銳器，盡可能使用塑料器材代替玻璃器材，必須使用時應(yīng)嚴格遵守銳器安全操作規(guī)程。
8 培養(yǎng)基、組織、體液及其他具有潛在危險性的廢棄物須按廢棄物處理制度處理。
9人員暴露于感染性物質(zhì)時，應(yīng)及時向?qū)嶒炇邑撠熑藚R報，并記錄事故經(jīng)過和處理方案。
10 禁止將無關(guān)動物帶入實驗室。
11 實驗過程中應(yīng)使用驗收合格的二級生物安全柜。
12 實驗設(shè)備在運出修理或維修前必須嚴格消毒。